副溶血弧菌感染12h和24h杂色鲍肝脏全长cDNA文库的构建

• 作者: 张子平 戴军 王淑红 王艺磊 邹志华
• 来源期刊: 中国水产科学
• 学科: 生物学
• 关键词: 杂色鲍 cDNA文库 SMART 免疫时相 肝脏
• 年，卷（期）: 2004,（3）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 190-195
• 页数: 6页
• 分类号: Q959.212
• 字数: 5154字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1005-8737.2004.03.003

摘要

采用RDP试剂提取杂色鲍(Haliotis diversicolor)不同免疫时相肝脏的总RNA,经Oligotex试剂盒纯化得到mRNA.根据SMART(switching mechanism at 5′end of RNA transcript)原理,利用含sfiIB酶切位点的Oligo(dT)引物合成cDNA第1条链,利用含sfiIA酶切位点的SMARTⅢ寡核苷酸作为cDNA第1条链在mRNA5′端延伸出去的模板,采用LD-PCR引物合成双链cDNA.双链cDNA用sfiI酶切和过柱分级分离后,与λTripEx2两臂进行连接,随后进行λ噬菌体体外包装反应,构建成杂色鲍不同免疫时相(12 h和24 h)全长cDNA文库.构建好的文库分别含有约5.04×106和2.95×106个重组子.插入cDNA长度分布在500 bp～3 kb,说明文库具有良好的质量,为进一步筛选、克隆杂色鲍免疫调控基因奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张子平	美国密歇根州立大学水产与野生生物系	6	345	5.0	6.0
2	王艺磊		3	116	3.0	3.0
3	戴军		2	63	2.0	2.0
4	邹志华		2	69	2.0	2.0
5	王淑红		2	69	2.0	2.0