GL-7ACA酰化酶基因工程菌(Escherichia coli MMR204/pZC1)批式补糖发酵条件优化

• 作者: 杨蕴刘 陈军 龚巍
• 来源期刊: 生物工程学报
• 学科: 工学
• 关键词: GL-7ACA酰化酶 基因工程菌 批式补料发酵
• 年，卷（期）: 2004,（6）
• 所属期刊栏目: 生物制药
• 页码范围: 953-957
• 页数: 5页
• 分类号: TQ92
• 字数: 4070字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-3061.2004.06.027

摘要

戊二酰-7-氨基头孢烷酸(GL-7-ACA)酰化酶(3.1.5.11)可有效催化GL-7ACA分子中戊二酰基侧链水解,形成7-氨基头孢烷酸(7-ACA)而成为两步酶法生产7-ACA的重要工业用酶之一.在已构建的GL-7ACA酰化酶基因(acy)重组质粒pZC1基础上,进一步对酰化酶基因工程菌Escherichia coli MMR204/pZC1的产酶发酵条件进行了考察.研究表明,工程菌的最佳发酵温度为33℃,pH7.5～8.5的微碱条件有利于酶的生成.LB培养基补加适量葡萄糖(1～5g/L),可提高发酵生物量和产酶水平,但葡萄糖的过量补加(6 g/L以上),则导致发酵液偏酸(低至pH4.0)而完全抑制酰化酶生成,并证明工程菌生长和产酶对乙酸的抑制效应较为敏感.同时通过5L自控发酵罐的批式补糖试验,对恒速流加、pH反馈控制和指数流加等三种补糖模式的发酵产酶进程进行了比较.结果发现,三种方式的补糖条件下,acy基因在tac启动子控制下,呈组成型表达,细胞生长与产酶同步,无需诱导;其中,以指数流加方式得到的生物量和产酶水平最高.而从acy基因的表达效率,即比酶活看,pH反馈的补料方法略高于恒速或指数流加模式.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈军	中国科学院上海植物生理生态研究所	74	507	14.0	19.0
2	龚巍	中国科学院上海植物生理生态研究所	1	7	1.0	1.0
3	杨蕴刘	中国科学院上海植物生理生态研究所	8	43	5.0	6.0