鸡Tie-2受体胞外片段的原核表达及目的蛋白免疫原性的研究

• 作者: 何秋明 刘成文 刘继彦 吴扬 宿静梅 文艳君 李秋 田聆 罗彦 胡兵 魏于全
• 来源期刊: 四川大学学报(医学版)
• 学科: 生物学
• 关键词: Tie-2 原核表达 纯化 复性 免疫原性
• 年，卷（期）: 2004,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 154-157
• 页数: 4页
• 分类号: Q812
• 字数: 3700字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-173X.2004.02.002

摘要

目的研究鸡Tie-2受体胞外片段(配体结合域)的原核表达以及目的蛋白对小鼠的抗原性.方法用PCR 方法从既往构建的包含鸡Tie-2受体胞外段基因的表达质粒扩增目的片段,进而构建PQE原核表达载体并诱导其目的蛋白的表达,将目的蛋白进一步纯化、复性并免疫小鼠,获得抗血清,用ELISA和Western blotting检测抗血清中抗体的存在. 结果经酶切分析及测序鉴定表明获得了鸡Tie-2受体胞外目的片段的PQE原核表达载体,能高效表达目的蛋白,将其免疫小鼠可产生抗重组蛋白的抗体.结论用原核表达的方式可成功的获得鸡Tie-2受体胞外目的片段的蛋白,并对小鼠产生免疫原性.