抗人VEGF单链抗体基因的克隆及突变校正

• 作者: 廖楚航 房思炼 李扬 杨西川 王大章
• 来源期刊: 实用医院临床杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 血管内皮生长因子 单链抗体 点突变
• 年，卷（期）: 2004,（1）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 26-29
• 页数: 4页
• 分类号: R392.11
• 字数: 3748字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-6170.2004.01.016

摘要

目的:回复基因克隆过程中的异常点突变,重新表达抗人血管内皮生长因子(VEGF)单链抗体基因(V11),恢复其抗原结合能力.方法:通过逆转录及多聚酶链式反应(RT-PCR),扩增抗人VEGF单克隆抗体(E11)的可变区基因片段,构建表达载体pET-15b(含E-tag).将V11轻、重链可变区基因序列(V11L、V11H)与其所属亚组共同序列和一致序列进行联配比较,发现异常氨基酸并分析其性质,确定异常突变点.PCR定点回复突变,重新表达单链抗体基因(V11m), ELISA检测表达产物与VEGF165的结合.结果:V11存在四个异常突变点:V11L第7、23、36位,V11H第113位.回复突变后的表达产物与VEGF165的结合能力显著提高.结论:利用抗体残基位置序列保守性及氨基酸侧链性质分析,可以推定并有助于回复异常点突变,该方法简便易行.获得的抗人VEGF单链抗体对恶性肿瘤的诊治具有潜在的应用价值.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	廖楚航	四川省人民医院口腔颌面外科	8	80	4.0	8.0
2	王大章	四川大学华西口腔医学院口腔颌面外科	90	664	14.0	20.0
3	杨西川	四川大学华西口腔医学院口腔颌面外科	3	13	2.0	3.0
4	李扬	四川大学华西口腔医学院口腔颌面外科	24	70	4.0	8.0
5	房思炼	四川大学华西口腔医学院口腔颌面外科	1	0	0.0	0.0