地衣芽孢杆菌β-1,3-1,4葡聚糖酶基因的克隆和表达

• 作者: 吕文平 孙建义 李卫芬 杜文理 许梓荣
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 学科: 农学
• 关键词: β-1,3-1,4葡聚糖酶 地衣芽孢杆菌 克隆 表达
• 年，卷（期）: 2004,（4）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 446-449
• 页数: 4页
• 分类号: S3
• 字数: 3699字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2004.04.019

摘要

提取地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)基因组,通过PCR克隆了该菌的β-1,3-1,4-葡聚糖酶基因全长.该基因全长818bp,ORF为732bp,编码243个氨基酸,计算分子量为27.35 kD,等电点为8.31.经Blast分析,该序列与短小芽孢杆菌(B.pumilus)同源性最高(99%),而与基因库中地衣芽孢杆菌的同源性为94%,该基因已被GenBank接受(AY225317).用BamH Ⅰ和XhoⅠ双酶切目的片断和表达载体pET-30a(+)后相连接,构建重组表达载体pET-lic,并导入大肠杆菌(Escherichia coli)BL21菌株中表达.酶学特性表明:SDS-PAGE电泳在27 kD左右有表达蛋白带,该工程菌总酶活达67.34 U/mL,是出发菌的60倍,最适温度在50℃左右,最适pH在5～6之间.该工程菌可作为材料构建耐热性好和酶活高的杂合基因工程菌.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	孙建义	浙江大学饲料科学研究所教育部动物分子营养重点实验室	101	1695	24.0	35.0
2	李卫芬	浙江大学饲料科学研究所教育部动物分子营养重点实验室	114	2074	25.0	39.0
3	许梓荣	浙江大学饲料科学研究所教育部动物分子营养重点实验室	443	7811	42.0	59.0
4	吕文平	浙江大学饲料科学研究所教育部动物分子营养重点实验室	5	45	4.0	5.0
5	杜文理	浙江大学饲料科学研究所教育部动物分子营养重点实验室	4	39	3.0	4.0