木霉 -1,3-1,4-葡聚糖酶性质及其cDNA片段克隆

• 作者: 孙建义 廖玉华 李卫芬 许梓荣
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 学科: 农学
• 关键词: 里氏木霉GXC -1,3-1,4-葡聚糖酶 酶学性质 克隆 测序
• 年，卷（期）: 2001,（1）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 81-85
• 页数: 5页
• 分类号: S18
• 字数: 3539字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2001.01.019

摘要

本研究探讨了里氏木霉GXC的 -1,3-1,4-葡聚糖酶特性，克隆和分析了酶基因片段。结果表明，粗酶液经硫酸铵沉淀、Sephadex G-25、Sephadex G-100和DEAE-Sephadex A-50 柱层析得到纯 -1,3-1,4-葡聚糖酶；经12.5%SDS-PAGE凝胶电泳表明，该酶的分子量为35.21 kD；酶最适反应pH5.0，最适反应温度为60℃；Michaelis-Menten 动力学分析表明， -1,3-1,4-葡聚糖酶的Km 和 Vmax 分别为10.86 mg/mL和 14 286 mol/(min mg)。通过RT- PCR方法扩增并克隆了 -1,3-1,4-葡聚糖酶cDNA片段，测序表明,该片段长度为280 bp；同源性分析显示，该cDNA片段与水解淀粉芽孢杆菌、厌氧真菌 Orpinomyces strain PC-2、枯草芽孢杆菌中的 -1,3-1,4-葡聚糖酶的基因片段有较高的同源性，分别为90%，79%，91%。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	孙建义	浙江大学华家池校区动物科学学院饲料科学研究所	101	1695	24.0	35.0
2	李卫芬	浙江大学华家池校区动物科学学院饲料科学研究所	114	2074	25.0	39.0
3	许梓荣	浙江大学华家池校区动物科学学院饲料科学研究所	443	7811	42.0	59.0
4	廖玉华	浙江大学华家池校区动物科学学院饲料科学研究所	3	13	2.0	3.0