D-乳酸脱氢酶基因克隆及其表达

• 作者: 刘如林 唐赟 李剑 梁凤来 马建芳
• 来源期刊: 微生物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 乳杆菌MD-1 D-乳酸脱氢酶 基因克隆 表达
• 年，卷（期）: 2004,（4）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 491-495
• 页数: 5页
• 分类号: Q78
• 字数: 3228字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0001-6209.2004.04.018

摘要

构建了一株产D,L-乳酸的乳杆菌(Lactobacillus sp. )MD-1的基因文库.利用乳酸脱氢酶和丙酮酸裂解酶缺陷的Escherichia coli FMJ144作为宿主,在厌氧条件下通过互补筛选获得乳酸脱氢酶基因(ldh),非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(Native-PAGE)检测证明其阳性克隆表现出D-乳酸脱氢酶(D-LDH)活性.核酸序列分析表明,ldhD的ORF编码331个氨基酸残基组成的蛋白质有两个保守区域,其中V147～D176区是NADH的结合位点,R77～E107区据报道是酶的活性部位.该菌株D-LDH和D羟基异己酸脱氢酶(D-HicDH)属于NADH依赖性脱氢酶家族,ldhD和其他乳杆菌属的ldhD及D-HicDH基因和编码的氨基酸序列相似性较低,核酸序列相似性最高达49.33%,氨基酸序列相同性最高为42%,是一个新的D-乳酸脱氢酶基因.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	唐赟	南开大学生命科学学院	6	66	4.0	6.0
2	梁凤来	南开大学生命科学学院	47	955	18.0	29.0
3	刘如林	南开大学生命科学学院	57	1223	23.0	33.0
4	李剑	南开大学生命科学学院	7	103	5.0	7.0