人源抗肝癌单链抗体scFv-CD3ζ基因真核载体的构建

• 作者: 付勇 刁建升 刘彦仿 孙妍琳 屈晓杰 李锴男 王健
• 来源期刊: 实用医药杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 单链抗体 共刺激信号 CD3ζ
• 年，卷（期）: 2004,（5）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 439-441
• 页数: 3页
• 分类号: R394.4
• 字数: 2533字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-4008.2004.05.038

摘要

目的克隆正常人T细胞CD3ζ的胞内区、跨膜区基因,将其与二硫键稳定的人源化抗肝癌的单链抗体scFv的基因克隆入真核表达载体,为制备肝癌靶向性嵌合锚定T细胞奠定基础,并探讨其对肝癌的杀伤活性.方法应用PCR法将二硫键稳定的人源化的单链抗体scFv的基因克隆入真核细胞表达载体pcDNA3,在5′端及3′端分别引入相应酶切位点;用RT-pCR法从正常外周血人T细胞扩增出CD3ζ的胞内区、跨膜区基因,然后将其克隆于scFv的下游,并在5′端及3′端引入相应的酶切位点.结果二硫键稳定的人源化抗肝癌的单链抗体scFv的cDNA片段为735bp与已知的序列相符;CD3ζ的胞内区、跨膜区的cDNA片段为294bp,与Gene Bank公布的序列一致.重组的表达载体经酶切琼脂糖电泳及测序加以证实.结论完成了二硫键稳定的人源化抗肝癌的单链抗体scFv及CD3ζ的胞内区、跨膜区融合基因真核表达载体pcDNA3-scFv-CD3ζ的构建,为制备肝癌靶向性嵌合锚定T细胞奠定了实验基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘彦仿	第四军医大学病理学教研室	110	509	12.0	15.0
2	李锴男	第四军医大学病理学教研室	10	23	3.0	4.0
3	孙妍琳	山东大学医学院病理学教研室	17	85	5.0	7.0
4	付勇	第四军医大学病理学教研室	18	58	3.0	6.0