SYBR Green实时荧光定量PCR技术平台的建立

• 作者: 胡成进 赵苗青 陈英剑
• 来源期刊: 实用医药杂志
• 学科: 医学
• 关键词: SYBR Green 实时荧光定量PCR 技术平台
• 年，卷（期）: 2004,（11）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 997-999
• 页数: 3页
• 分类号: R446.6
• 字数: 3137字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-4008.2004.11.024

摘要

目的建立SYBR Green实时荧光定量PCR技术平台.方法通过摸索SYBR Green工作液的配制方法,经典PCR检测HBV DNA方法转为SYBR Green实时荧光定量PCR方法及建立大鼠TGF-batelmRNA表达水平的SYBR Green实时荧光定量PCR方法.结果SYBR Green Ⅰ工作液,40×H2O溶液稳定性好,最佳反应浓度为1:10000.HBV DNA的SYBR Green实时荧光定量PCR方法,最佳的MgCl2反应浓度4.0mmol,引物浓度0.5μmol,81℃时收集荧光信号.定量分析用标准曲线斜率为-3.32,相关系数为-0.994,误差为0.016.大鼠TGF-batel表达水平的SYBR Green实时荧光定量PCR方法,TGF-batel和Bate-actin的最佳MgCl2反应浓度均为3.5mmol,引物浓度前者为0.8μmol,后者为0.5μmol,在87℃时收集荧光信号.靶基因TGF-batelmRNA的相对量用下述公式计算:(1+Etgf)Ct1/(1+Eact)Ct2.结论初步建成了可检测DNA和mRNA的SYBR Green实时荧光定量PCR技术平台.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	胡成进	济南军区总医院实验诊断科	192	858	15.0	20.0
2	陈英剑	济南军区总医院实验诊断科	106	596	13.0	18.0
3	赵苗青	济南军区总医院实验诊断科	2	70	2.0	2.0