猪瘟病毒E2基因主要抗原区原核表达载体的构建及表达

• 作者: 张彦明 胡慧 邱昌庆
• 来源期刊: 中国兽医科技
• 学科: 农学
• 关键词: 猪瘟病毒 E2基因 表达载体构建 原核表达
• 年，卷（期）: 2004,（1）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 3-7
• 页数: 5页
• 分类号: S852.659.6
• 字数: 4614字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-4696.2004.01.001

摘要

用RT-PCR技术对猪瘟兔化弱毒C株、石门强毒株(Shimen)、近期地方流行的属于第1群毒株的新疆毒株(XJ)和第2群代表毒株甘肃临洮(LT)株E2基因的主要抗原区进行扩增,均得到约561 bp的基因片段;经克隆测序及序列分析,该基因编码187个氨基酸残基,预计蛋白分子质量为21.7 ku.将这4个基因分别克隆到原核表达载体pGEX-4T-1中,经酶切、PCR扩增和测序分析确证其正确插入到表达载体中,阅读框是正确的,从而构建成重组表达载体.重组质粒转化至宿主菌BL21(DE3)中,用异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)进行诱导表达,对表达的蛋白用SDS-PAGE电泳、免疫印迹和薄层凝胶扫描分析.结果表明,E2基因的主要抗原区可以在大肠埃希氏菌中表达,表达的蛋白多以包涵体形式存在,表达产物的分子质量约为50.0 ku,与理论推测的分子质量一致;薄层凝胶扫描分析表明,表达蛋白约占菌体蛋白总量的20.1%;免疫印迹结果证明,表达的E2蛋白可被猪瘟阳性血清所识别.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张彦明	西北农林科技大学动物科技学院	256	1530	16.0	24.0
2	胡慧	西北农林科技大学动物科技学院	5	26	2.0	5.0
6	邱昌庆		9	34	4.0	5.0