利用枯草杆菌整合表达嗜铬粒蛋白抗真菌片段

• 作者: 吴江雪 官文俊 张添元 李瑞芳 罗进贤 贺国安
• 来源期刊: 中山大学学报(自然科学版)
• 学科: 生物学
• 关键词: 嗜铬粒蛋白N区 基因表达 枯草杆菌 微转座子 抗真菌活性
• 年，卷（期）: 2004,（5）
• 页码范围: 73-75
• 页数: 3页
• 分类号: Q78
• 字数: 2119字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0529-6579.2004.05.021

摘要

为实现CGA1-76片段基因在枯草杆菌中的稳定表达,将CGA1-76片段基因的表达元件重组到枯草杆菌转座子质粒pHV1249微转座子mini-Tn10内,利用mini-Tn10将CGA1-76片段基因的表达元件整合到枯草杆菌DB1342染色体上,用氯霉素和红霉素筛选枯草杆菌转座工程菌DB1342(TnSVTQ).DB1342(TnSVTQ)在无选择压力条件下经10 d连续传代培养,转座子内氯霉素抗性丢失率为0%,说明转座子稳定整合在DB1342染色体上.SDS-PAGE和免疫印迹分析结果表明,在蔗糖诱导下,CGA1-76片段基因在DB1342(TnSVTQ)中获得表达,产物被分泌到细胞外.孔穴琼脂扩散法测定表达上清的抑制真菌活性,结果表明重组CGA1-76能抑制烟曲霉菌和黄曲霉菌的生长,抑菌圈直径分别为9 mm和8 mm.