华支睾吸虫翻译控制肿瘤蛋白(TCTP)基因的鉴定及其编码区序列克隆

• 作者: 何东苟 余新炳 吴德 吴忠道 徐劲 胡旭初 陈守义
• 来源期刊: 中国人兽共患病杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 华支睾吸虫 翻译控制肿瘤蛋白 克隆
• 年，卷（期）: 2004,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 117-121
• 页数: 5页
• 分类号: R383.2
• 字数: 3826字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2004.02.011

摘要

目的通过cDNA文库筛选识别华支睾吸虫新基因,并将所发现的华支睾吸虫翻译控制肿瘤蛋白(csTCTP)编码区克隆到原核表达质粒PGEX-4T-1和真核表达质粒pcDNA3上,为进一步研究其功能奠定基础.方法将插入于pBluescript质粒上的cDNA进行随机测序,在NCBI和ExPasy网站上进行序列分析,识别华支睾吸虫新基因,并应用Motifsan、Scanprosite等程序对其进行结构域分析.根据PGEX-4T-1和pcDNA3上的克隆位点及所发现的csTCTPcDNA编码序列设计引物,进行PCR扩增,扩增产物回收纯化后克隆到原核表达载体PGEX4T-1和真核表达载体pcDNA3上.构建的PGEX4T-1-csTCTP、pcDNA3-csTCTP重组表达质粒经PCR、双酶切及测序证实.结果发现华支睾吸虫新基因--csTCTP,完整阅读框含510个碱基,编码169个氨基酸,理论分子量为19.4596 Kd.序列分析表明,csTCTP编码氨基酸序列与其它物种有较高的同源性,Motifscan及Scanprosite程序发现推导的氨基酸序列具有TCTP保守的完整功能域以及两个典型的TCTP完整标签.所构建的重组原核和真核表达质粒经PCR、双酶切及测序证实与目标基因相符.结论发现华支睾吸虫翻译控制肿瘤蛋白基因,并成功构建原核和真核重组表达质粒.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	余新炳	中山大学中山医学院病原生物学部	201	1352	17.0	28.0
2	吴忠道	中山大学中山医学院病原生物学部	171	835	14.0	21.0
3	徐劲	中山大学中山医学院病原生物学部	104	568	13.0	17.0
4	胡旭初	中山大学中山医学院病原生物学部	108	574	13.0	17.0
5	陈守义	中山大学中山医学院病原生物学部	31	211	8.0	13.0
6	吴德	中山大学中山医学院病原生物学部	25	246	8.0	15.0
7	何东苟	中山大学中山医学院病原生物学部	10	147	6.0	10.0