华支睾吸虫CsSCCRO基因的克隆表达和蛋白纯化

• 作者: 余新炳 徐劲 胡凤玉 胡旭初 谢红艳 赵玉利
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: 华支睾吸虫 鳞状上皮癌相关肿瘤基因(SCCRO) 纯化
• 年，卷（期）: 2006,（10）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 906-908
• 页数: 3页
• 分类号: R3
• 字数: 2719字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2006.10.003

摘要

目的 原核表达华支睾吸虫鳞状上皮癌相关肿瘤基因 (SCCRO)全长编码区序列,获得纯化的重组蛋白,为进一步功能研究做好准备.方法 用生物信息学方法从华支睾吸虫成虫全长cDNA文库中识别出与人鳞状上皮癌相关基因的同源序列及其全长编码区,将其编码区序列克隆到原核表达载体PET-30a(+),测序鉴定重组质粒,在大肠杆菌BL-21/DE3中用IPTG诱导表达,重组产物用His-镍蛋白纯化柱纯化.结果 华支睾吸虫鳞状上皮癌相关基因长度为1 218bp,其全长编码序列长度为780bp, 编码259个氨基酸,1-22位为分泌信号肽,在羧基端有一个高度保守的区域.该基因在大肠杆菌中得到了高效的可溶性表达,重组蛋白达总蛋白的39%,纯化后的重组蛋白纯度可达98%.结论 鳞状上皮癌相关基因的PET-30a(+)原核重组质粒在大肠杆菌BL-21/DE3中可以稳定高效地表达可溶性蛋白.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	余新炳	中山大学基础医学院寄生虫教研室	201	1352	17.0	28.0
2	徐劲	中山大学基础医学院寄生虫教研室	104	568	13.0	17.0
3	胡旭初	中山大学基础医学院寄生虫教研室	108	574	13.0	17.0
4	胡凤玉	中山大学基础医学院寄生虫教研室	6	31	4.0	5.0
5	谢红艳	中山大学基础医学院寄生虫教研室	5	16	3.0	3.0
6	赵玉利	中山大学基础医学院寄生虫教研室	2	8	2.0	2.0