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摘要:
目的构建表达幽门螺杆菌临床株粘附素(HpaA)的重组质粒,在大肠杆菌中表达获得重组蛋白,探讨重组蛋白作为Hp抗原在感染诊断中的价值.方法用PCR方法从幽门螺杆菌临床株DNA中扩增HpaA基因片段.克隆及序列分析后在大肠杆菌中进行高效表达,表达产物经纯化和Western blot鉴定后,作为Hp抗原,ELISA法对100例临床标本进行相应抗体检测,并与细菌培养、组织学染色和快速尿素酶试验比较来评价其应用的可行性.结果经酶切、测序分析插入的基因片段全长783bp,与基因文库中的粘附素基因同源性达98.87%.表达蛋白经SDS-PAGE分析,相对分子量(Mr)约为30000,可溶性表达占全菌的41.67%以上,经亲和层析后可获得纯度为90%以上的重组蛋白.Western blot证实了其免疫反应性.通过对临床病例的检测结果显示细菌培养、组织学染色、快速尿素酶试验和HpaA抗体检测的敏感性、特异性和准确性分别为100.0%和80.9%;100.0%;和90.5%;90.5%和85.8%;93.3%和85.9%,相差不多.结论 HpaA能在大肠杆菌中高效表达,具有较强的免疫反应性,作为检测试剂敏感性和特异性均较好,有望成为Hp新的非侵入性的检测方法.
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文献信息
篇名 幽门螺杆菌临床株粘附素HapA基因的克隆表达及在诊断中的价值
来源期刊 中国人兽共患病杂志 学科 医学
关键词 幽门螺杆菌 粘附素 基因克隆 诊断
年,卷(期) 2004,(4) 所属期刊栏目
研究方向 页码范围 275-278
页数 4页 分类号 R378.2
字数 3001字 语种 中文
DOI 10.3969/j.issn.1002-2694.2004.04.002
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 杨致邦 重庆医科大学微生物学教研室 119 522 12.0 17.0
2 吴利先 重庆医科大学微生物学教研室 52 158 8.0 9.0
6 刘淼 重庆医科大学微生物学教研室 11 74 5.0 8.0
7 林珊珊 重庆医科大学微生物学教研室 9 41 4.0 6.0
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幽门螺杆菌
粘附素
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诊断
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期刊影响力
中国人兽共患病学报
月刊
1002-2694
35-1284/R
大16开
福建省福州市津泰路76号
34-46
1985
chi
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