人Trail分子的克隆、表达及鉴定

• 作者: 李宁 范学工
• 来源期刊: 中国现代医学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 肿瘤坏死因子相关调亡诱导配体 克隆 基因表达 细胞凋亡
• 年，卷（期）: 2004,（3）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 82-85
• 页数: 4页
• 分类号: Q785|Q786
• 字数: 2652字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-8982.2004.03.025

摘要

目的克隆人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TNF-related apoptosis-inducing ligand,Trail)基因,并在原核细胞中进行有效表达及纯化后,获得有生物活性的Trail蛋白.方法采用RT-PCR,从激活的人淋巴细胞中扩增Trail胞外区cDNA,将其克隆至载体pGEM-T中,经酶切和测序后,亚克隆构建重组原核表达载体pGEX-5X-Trail,转化大肠杆菌(HBl01),并进行表达和纯化.结果得到了Trail基因,构建了在HB101中表达的重组质粒pGEX-5X-Trail,纯化后,检测发现重组人Trail融合蛋白(rhTrail)对人肝癌细胞株HepG2有诱导凋亡的作用.结论该文成功地构建了人Trail基因高效表达系统,所表达的rhTrail具有良好诱导肿瘤细胞凋亡的活性,为今后的深入研究打下基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	范学工	中南大学湘雅医院传染科	227	1554	19.0	25.0
2	李宁	中南大学湘雅医院传染科	123	746	14.0	19.0