牛分枝杆菌MPB51基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达

• 作者: 何昭阳 姜秀云 王春凤 王春芳
• 来源期刊: 微生物学报
• 学科: 农学
• 关键词: 牛分枝杆菌 MPB51基因 克隆 原核表达
• 年，卷（期）: 2005,（2）
• 所属期刊栏目: 研究简报
• 页码范围: 298-300
• 页数: 3页
• 分类号: S852.61
• 字数: 2998字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0001-6209.2005.02.029

摘要

以牛分枝杆菌Vallee111染色体DNA为模板,以MPB51成熟蛋白基因特异性引物进行PCR扩增,获得约800bp的DNA片段.通过T-A克隆技术,将PCR产物克隆至pGEM-T Vector中,成功地构建出克隆质粒pGEM-T-51.以BamHⅠ和EcoRⅠ双酶切pGEM-T-51和pET28a(+),并将纯化的MPB51基因亚克隆至pET28a (+)中,构建出原核表达质粒pET28a-51.将pET28a-51转化至感受态E.coli BL21(DE3)中,经IPTG诱导和SDS-PAGE分析,可见约30kD外源蛋白带.Western blot分析发现,该蛋白具有牛分枝杆菌抗原性,从而为进一步研究MPB51的亚单位疫苗及DNA疫苗奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	何昭阳	吉林农业大学动物科技学院	56	624	14.0	23.0
2	王春芳	吉林农业大学动物科技学院	33	111	6.0	8.0
3	姜秀云	吉林农业大学生物技术学院	42	147	7.0	9.0
4	王春凤	吉林农业大学动物科技学院	134	596	12.0	16.0