ES-D3细胞nanog基因干扰载体的构建及其干涉效果

• 作者: 华进联 庄淑珍 杨炜峰 窦忠英 韩雅婷
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 学科: 生物学
• 关键词: ES-D3细胞 nanog基因 干扰载体 RNA干扰
• 年，卷（期）: 2005,（6）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 754-758
• 页数: 5页
• 分类号: Q93
• 字数: 3701字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2005.06.013

摘要

选择ES细胞nanog基因中4个区域合成寡聚核苷酸,构建了4个含有小鼠U6启动子的siRNA(小分子干涉RNA)表达载体并瞬时转染小鼠ES-D3细胞.半定量RT-PCR分析显示,所构建的4个siRNA表达载体中有3个可以在细胞内转录出siRNA或shRNA(短发夹RNA),诱发RNA干涉(RNAinterference,RNAi),能显著抑制目的基因nanog的表达;同时发现,干扰的ES-D3细胞生长48 h后,集落形态与未干扰细胞相比差别不大,但隆起不如后者明显,形态也不如后者规则,生长速度也较慢,AKP染色阳性,与未转染细胞相比没有差别.