人血管抑制因子vasostatin片段在大肠杆菌中的融合表达、纯化及活性检测

• 作者: 付小兵 吴晓萍 姚琼凤 李校堃 王莹
• 来源期刊: 感染、炎症、修复
• 关键词: vasostatin片段 GST融合蛋白 血管生成抑制
• 年，卷（期）: 2005,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 29-33
• 页数: 5页
• 字数: 3497字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-8521.2005.01.009

摘要

目的:克隆表达人vasostatin片段,纯化目的蛋白并检查活性,以研究人血管抑制因子vasostatin片段的活性区域.方法:重组构建人vasostatin片段和谷胱甘肽S转移酶(GST)融合表达质粒,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达.通过GST亲和凝胶纯化目的蛋白,用凝血酶(Thrombin)酶切纯化产物获得单体vasostatin片段,并采用MTT法检测其抑制内皮细胞增殖活性.结果:表达产物主要以包涵体形式存在,改变诱导条件可增加可溶性表达量,包涵体形式的表达量约占菌体蛋白总量的55%.活性试验表明,各GST-vasostatin片段和vasoatatin片段具有程度不同的抑制bFGF诱导的内皮细胞增殖的活性,其中以片段vasostatin氨基酸135-164的抑制活性最为显著.结论:人vasostatin片段中氨基酸135-164是抑制内皮细胞增殖活性较强的片段.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	付小兵		1	0	0.0	0.0