人IL-24基因的克隆、 表达、 纯化及体外诱导肿瘤细胞凋亡的研究

• 作者: 张卫军 杨珺 杨琴 蔡绍皙 邹全明
• 来源期刊: 细胞与分子免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 人IL-24 克隆 表达 亲和层析 抗肿瘤活性
• 年，卷（期）: 2005,（6）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 693-696
• 页数: 4页
• 分类号: R392|Q786
• 字数: 3478字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1007-8738.2005.06.009

摘要

目的: 克隆人白细胞介素-24(IL-24)基因, 在大肠杆菌中融合表达,纯化复性,研究此融合蛋白的抗肿瘤活性.方法: 分离人外周血单个核细胞, ConA刺激培养, 提取细胞总RNA, RT-PCR技术克隆人IL-24基因.将IL-24插入到pET32a(+)中,构建重组表达载体IL-24/pET32a,IPTG诱导在E.coli表达.Edman法N端测序,将鉴定正确的蛋白亲合层析纯化.MTT比色法体外分析杀伤肿瘤细胞的活性.结果: 获得人IL-24基因,序列分析与GenBank公布一致.表达载体用双酶切和PCR鉴定正确.重组工程菌经IPTG诱导后表达相对分子质量(Mr)约为35 000 的融合蛋白.N端测序正确, 鉴定该蛋白以包涵体形式表达.包涵体经洗涤、溶解后,亲合纯化得到纯度大于95%的融合蛋白.复性后表达产物能显著诱导MCF-7乳腺癌细胞凋亡(P<0.05).结论: IL-24融合蛋白在原核细胞中高效表达,并获得高纯度、在体外明显诱导乳腺癌细胞凋亡的重组蛋白,为后续的研究提供实验基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨琴	第三军医大学检验系临床微生物教研室	14	34	3.0	5.0
2	邹全明	第三军医大学检验系临床微生物教研室	258	1589	19.0	26.0
3	张卫军	第三军医大学检验系临床微生物教研室	58	319	11.0	13.0
4	蔡绍皙	重庆大学生物力学与组织工程教育部重点实验室	220	1766	19.0	32.0
5	杨珺	重庆大学生物力学与组织工程教育部重点实验室	17	287	10.0	16.0