人白介素24基因克隆表达、纯化及活性检测

• 作者: 丁嵩涛 宋方洲 易发平 李成华 杨俊霞 石华 马永平 魏丽丽
• 来源期刊: 中国现代医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 人IL-24基因 克隆 原核表达纯化 MTT
• 年，卷（期）: 2007,（22）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 2710-2713
• 页数: 4页
• 分类号: R730.5
• 字数: 2678字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-8982.2007.22.006

摘要

目的 克隆人IL-24基因,构建原核表达栽体,表达纯化GST-IL-24融合蛋白,检测其活性.方法 用密执毒素诱导HeLa细胞表达IL-24 mRNA,通过RT-PcR获取IL-24 cDNA,将其克隆至原核表达裁体pGEX-4T-2,IPTG诱导表达,经GSTrapTM FF column亲合纯化,SDS-PAGE和Western blot检测融合蛋白的表达,MTT法检测GST-IL-24对宫颈癌CaSKi细胞的抑制作用.结果 克隆得到人IL-24的cDNA,序列与GenBank公布序列完全一致,SDS-PAGE电泳可见50 kD大小的融合蛋白表达.GST-IL-24以剂量依赖的方式抑制宫颈癌CasKi细胞的生长.结论 成功构建人IL-24基因原核表达载体,表达纯化得到GST-IL-24,该融合蛋白时宫颈癌CasKi细胞具有抑制作用.