抗HIV-1重组导向毒素SL120在毕赤酵母中的表达及其活性检测

• 作者: 尹革芬 张立树 徐一鸣 李子建 王宏 金宁一 金洪涛
• 来源期刊: 生物工程学报
• 学科: 生物学
• 关键词: HIV-1 gp120 单链抗体 金黄色葡萄菌外毒素A 分泌表达 毕赤酵母
• 年，卷（期）: 2005,（3）
• 所属期刊栏目: 生物制药
• 页码范围: 473-477
• 页数: 5页
• 分类号: Q786
• 字数: 4483字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-3061.2005.03.025

摘要

以pPIC9K为载体,构建抗HIV-1gp120单链抗体scFv120与葡萄球菌肠毒素A(Staphylococcal enterotoxin A,SEA)融合基因表达质粒,线性化、电转化法整合入巴斯德毕赤酵母菌,经表型鉴定、PCR分析和G418筛选得到Muts型多拷贝整合菌,甲醇诱导培养可分泌表达57kD的预期大小蛋白-重组导向毒素SL120,表达量达50.1mg/L.通过单链抗体亲和力测定,表明蛋白SEA和scFv120的构象有微弱的相互影响,但此重组导向毒素仍可高效介导CTLs杀伤HIV-1靶细胞.