小干扰RNA体外抑制HBs-GFP融合基因的表达

• 作者: 倪勤 徐宁 李星仪 潘修成 羊正纲 金晗英 陈智
• 来源期刊: 浙江大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 肝炎病毒,乙型 RNA/遗传学 RNA干扰 表面抗原 绿荧光蛋白
• 年，卷（期）: 2005,（2）
• 所属期刊栏目: 专题报道
• 页码范围: 110-115
• 页数: 6页
• 分类号: R512.62
• 字数: 4609字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3785/j.issn.1008-9292.2005.02.004

摘要

目的:利用增强型绿荧光蛋白(EGFP)和小发夹RNA(shRNA)表达载体技术,建立一种行之有效且相对经济的验证siRNA的方法.方法:将HBV S基因融合到EGFP中,建立HBs-GFP融合基因表达载体;同时构建带U6+27 RNA转录启动子的shRNA表达载体pAVU6+4sh357.二载体共转染HepG2细胞后,流式细胞仪检测HBs-GFP蛋白的荧光强度;同时RT-PCR和实时定量PCR法检测HBs-GFP mRNA水平的改变.结果:小干扰RNA有效抑制目的基因的表达,共转染后第72 h荧光蛋白抑制率为55.4%;HBs-GFP 融合基因的RNA表达受到显著抑制,抑制率达到90%.结论:载体法表达的小干扰RNA体外显著抑制HBs-GFP融合基因的表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈智	浙江大学医学院附属第一医院传染病研究所	162	1080	15.0	27.0
2	羊正纲	浙江大学医学院附属第一医院传染病研究所	11	54	4.0	7.0
3	倪勤	浙江大学医学院附属第一医院传染病研究所	13	70	6.0	8.0
4	徐宁	浙江大学医学院附属第一医院传染病研究所	9	57	5.0	7.0
5	潘修成	浙江大学医学院附属第一医院传染病研究所	3	14	2.0	3.0
6	金晗英	浙江大学医学院附属第一医院传染病研究所	4	17	3.0	4.0