大肠杆菌志贺毒素stxB融合基因的构建及其高效表达

• 作者: 冯书章 刘军 孙洋 尹铁勇 庄永菊 祝令伟 郭学军 齐翀
• 来源期刊: 中国兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 志贺毒素B亚基 融合蛋白 高效表达 包涵体
• 年，卷（期）: 2005,（1）
• 所属期刊栏目: 人兽共患病
• 页码范围: 28-30
• 页数: 3页
• 分类号: S852.61|Q78
• 字数: 2131字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-4545.2005.01.010

摘要

利用PCR方法,从肠出血性大肠杆菌O157:H7的基因组DNA中,分别扩增出Stx1B和Stx2B亚基的结构基因片段,然后再通过PCR将这2个片段连接起来,并定向克隆到表达质粒pET28a的Nco I和EcoR Ⅰ位点之间,构建了重组表达质粒pMB1.将重组质粒转化到宿主菌BL21(DE3)中,对重组菌株BL21(pMB1)用IPTG进行诱导表达,并对最佳诱导时间进行了探索.SDS-PAGE电泳检测结果表明,重组菌株表达出了16 300的目的蛋白Stx2B-L-Stx1B;经薄层扫描分析表明,表达量约占菌体总蛋白的68.4%,且目的蛋白为包涵体表达,表达量约占细菌沉淀的84.6%.研究还表明,未用IPTG诱导的BL21(pMB1)菌株也可有少量目的蛋白的基础表达.不同诱导时间的结果表明,在3～7 h的诱导时间内,目的蛋白的表达量没有明显变化.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	冯书章	解放军军需大学军事兽医研究所	22	164	7.0	12.0
2	孙洋	解放军军需大学军事兽医研究所	10	110	4.0	10.0
3	刘军	解放军军需大学军事兽医研究所	12	106	4.0	10.0
4	郭学军	解放军军需大学军事兽医研究所	11	129	5.0	11.0
5	尹铁勇	解放军军需大学军事兽医研究所	3	58	2.0	3.0
6	祝令伟	解放军军需大学军事兽医研究所	3	61	3.0	3.0
7	齐翀	解放军军需大学军事兽医研究所	1	3	1.0	1.0