人骨形态发生蛋白-2真核表达质粒的制备、转染及表达

• 作者: 康春雨 章庆国
• 来源期刊: 现代医学
• 学科: 医学
• 关键词: 骨形态发生蛋白-2 真核表达质粒 骨髓基质细胞 基因转染
• 年，卷（期）: 2005,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 302-305
• 页数: 4页
• 分类号: R782.2
• 字数: 2708字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-7562.2005.05.006

摘要

目的制备含人骨形态发生蛋白-2(hBMP-2)基因的真核表达质粒,获得可稳定高效表达BMP-2的兔骨髓基质细胞,为进一步研究BMP-2在骨牵张区的成骨作用作准备.方法制备携带有hBMP-2的全长真核表达质粒pcDNA3.1-BMP2.通过脂质体法将所得到的重组真核质粒转染到兔骨髓基质细胞中,用G418进行梯度筛选,从而得到能够稳定表达hBMP-2的细胞克隆.采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测骨髓基质细胞(MSCs)hBMP-2 mRNA的表达.结果重组质粒通过EcoRI酶切后,电泳图示约1.5kb的hBMP-2的目的片段及5.5kb的载体片段,经测序显示核苷酸序列正确无误.经RT-PCR检测hBMP-2在转录水平mRNA的表达情况,提示转染组hBMP-2的mRNA量较空白对照组明显增加.结论成功制备了含hBMP-2基因的真核表达质粒,转染后获得了高效表达hBMP-2的兔骨髓基质细胞.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	章庆国	东南大学附属中大医院整形外科	42	244	9.0	13.0
2	康春雨	东南大学附属中大医院整形外科	7	12	2.0	3.0