重组小鼠凝血因子Ⅶ-pPIC9K表达载体的构建及其在毕赤酵母中的表达

• 作者: 何飞 杨峥嵘 王蒙 程天民 粟永萍
• 来源期刊: 中国肿瘤生物治疗杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 凝血因子Ⅶ 组织因子 毕赤酵母 定点突变
• 年，卷（期）: 2005,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 99-102
• 页数: 5页
• 分类号: R730.5|R73.3
• 字数: 2240字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3872/j.issn.1007-385X.2005.02.004

摘要

目的: 构建去除凝血功能,但保留TF亲和力的rmFⅦ-pPIC9K表达载体并用毕赤酵母表达目的蛋白.方法: 通过RT-PCR自小鼠肝脏获得FⅦcDNA,对其进行定点突变后连入pPIC9K质粒,电击转化Gs115酵母细胞,经G418筛选、BMGY/BMMY小量摇瓶培养表达目的蛋白,并进行初步的凝血、结合活性鉴定.结果: 成功构建了3种rmFⅦ-pPIC9K表达载体(M1:LCmFⅦ-pPIC9K;M2:K341AmFⅦ-pPIC9K;M3:QEAmFⅦ-pPIC9K),并通过酵母表达获得相应蛋白,经初步活性鉴定其中两种符合设计目的.结论: 毕赤酵母表达rmFⅦ蛋白,为抗肿瘤血管药物的研究、肿瘤的分子靶向性治疗奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	何飞	第三军医大学新桥医院口腔科	24	224	9.0	14.0