家蝇防御素在大肠杆菌中的表达、纯化与抗体制备

• 作者: 王来城 王金星 蔡莹 赵小凡
• 来源期刊: 动物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 家蝇 抗菌肽 重组表达
• 年，卷（期）: 2005,（2）
• 所属期刊栏目: 方法和观点
• 页码范围: 327-334
• 页数: 8页
• 分类号: Q96
• 字数: 7302字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-5507.2005.02.020

摘要

家蝇防御素是从家蝇中克隆得到的1种抗菌肽.为了进一步研究家蝇防御素的功能和制备特异性抗体,采用大肠杆菌表达外源蛋白的方法,进行了家蝇防御素原核表达的研究.根据克隆到的家蝇防御素基因(Mdde)的cDNA序列,设计特异性引物,PCR扩增成熟肽的cDNA片段,将成熟肽序列重组到表达载体pGEX-4T-1中,构建m-Mdde/pGEX-4T-1重组表达载体,在大肠杆菌BL21中诱导表达,重组表达的融合蛋白GST-Mdde占菌体总蛋白的33.4%.纯化得到GST-Mdde后,再用凝血酶将其从特定位点切开,得到表达的m-Mdde.液体抑菌实验结果初步表明,表达的融合蛋白GST-Mdde对细菌生长有一定的抑制作用.利用纯化的GST-Mdde融合蛋白,制备了抗血清 [动物学报 51(2):327-334,2005].

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王来城	山东大学生命科学学院	27	254	9.0	15.0
2	赵小凡	山东大学生命科学学院	50	618	13.0	24.0
3	王金星	山东大学生命科学学院	53	698	15.0	25.0
4	蔡莹	山东大学生命科学学院	6	71	5.0	6.0