猪胸膜肺炎放线杆菌荚膜多糖基因的原核表达及其产物的细胞毒性

• 作者: 何启盖 刘丽娜 刘正飞 贝为成 陈焕春
• 来源期刊: 中国兽医科技
• 学科: 农学
• 关键词: 猪胸膜肺炎放线杆菌 荚膜多糖基因 克隆 表达 细胞毒性试验
• 年，卷（期）: 2005,（10）
• 所属期刊栏目: 微生物学
• 页码范围: 761-765
• 页数: 5页
• 分类号: S852.619|Q786
• 字数: 4042字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-4696.2005.10.002

摘要

参考GenBank中猪胸膜肺炎放线杆菌(App)血清2型荚膜多糖基因的序列分别设计了3对特异性引物,通过PCR分别扩增了CpsA、CpsB、CpsC 3个基因,获得长约1 137、429、1 146 bp的片段,将其分别克隆到pMD 18-T中,经酶切鉴定和序列分析获得了阳性克隆子;再将CpsA、CpsB、CpsC分别插入原核表达载体pGEX-KG后,转化BL21,在IPTG诱导下获得高效表达,经Western-blotting检测证实,表达产物CpsC有生物学活性,CpsA、CpsB无活性;将3种表达产物等量混合,做10倍递进稀释后,与分离出的猪嗜中性粒细胞作用,37 ℃、50 mL/L CO2培养箱中温育4 h后加入底物液,测定D492 nm值.结果表明,App荚膜多糖对猪嗜中性粒细胞无毒性作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈焕春	华中农业大学动物医学院	331	4866	36.0	53.0
2	何启盖	华中农业大学动物医学院	170	2510	25.0	42.0
3	刘正飞	华中农业大学动物医学院	40	892	15.0	29.0
4	刘丽娜	华中农业大学动物医学院	16	217	9.0	14.0
5	贝为成	华中农业大学动物医学院	9	111	5.0	9.0