人快速收缩骨骼肌肌钙蛋白I在大肠杆菌中的表达及建立其快速复性方法

• 作者: 华子春 颜明
• 来源期刊: 东南大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 肌,骨骼 肌钙蛋白Ⅰ/生物合成 大肠杆菌 克隆,分子 复性方法 新生血管化,病理性
• 年，卷（期）: 2005,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 36-38
• 页数: 3页
• 分类号: R3
• 字数: 2709字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-6264.2005.01.010

摘要

目的:在大肠杆菌中克隆和表达人快速收缩骨骼肌肌钙蛋白I(troponin Ⅰ,Tn Ⅰ),建立一种Tn Ⅰ快速复性方法.方法:通过PCR方法将人Tn Ⅰ基因克隆在大肠杆菌表达质粒pET28a中,经过PCR和DNA序列测定验证,并通过IPTG诱导表达.结果:通过PCR和DNA核酸序列分析,证实获得的基因片段为Tn Ⅰ全编码序列,Tn Ⅰ被克隆在大肠杆菌表达质粒pET28a中,重组表达质粒在大肠杆菌BL21(DE3)中经IPTG诱导获得表达,表达水平为占菌体总蛋白的40%,Tn Ⅰ包涵体产物经过对1-mmol*L-1透析复性,获得了抑制血管新生的生物活性.结论:构建了Tn Ⅰ表达菌株,经诱导获得Tn Ⅰ的高效表达,建立了简易的Tn Ⅰ体外复性方法,为Tn Ⅰ的深入研究和应用奠定了坚实的基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	华子春	南京大学医药生物技术国家重点实验室	125	473	11.0	17.0
2	颜明	南京大学医药生物技术国家重点实验室	1	3	1.0	1.0