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华支睾吸虫线粒体苹果酸脱氢酶基因的原核表达及重组蛋白的功能鉴定
华支睾吸虫线粒体苹果酸脱氢酶基因的原核表达及重组蛋白的功能鉴定
基本信息来源于合作网站,原文需代理用户跳转至来源网站获取
华支睾吸虫
线粒体苹果酸脱氢酶
异源表达
酶动力学参数
抑制
摘要:
目的克隆肝吸虫线粒体苹果酸脱氢酶基因并在大肠杆菌内表达,同时对表达的重组蛋白进行初步的功能分析,为进一步的研究和药物筛选打下基础.方法通过大规模测序从肝吸虫cDNA文库中确定肝吸虫线粒体苹果酸脱氢酶基因,采用PCR方法扩增出目的片段,与表达质粒pGEX-4T-1连接构建重组质粒,IPTG诱导表达;研究重组蛋白的理化性质及酶动力学特征,并寻找可能的抑制剂.结果成功表达出约64 kDa的重组蛋白,凝血酶切后为36 kDa蛋白,其酶活性为63.6 U/mg.1.14 mM 4,4′-二甲氨基联苯甲醇处理30 min酶活性下降了60%;吡喹酮、灭滴灵和阿苯哒唑对酶活性无抑制作用;而5'-单磷酸腺苷对重组酶有竞争性抑制作用,其Ki为0.49.结论成功地表达了目的蛋白,为药物筛选提供了一个易于获得的候选蛋白分子.
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原核表达
内容分析
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引文网络
相关学者/机构
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期刊文献
内容分析
关键词云
关键词热度
相关文献总数
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文献信息
篇名
华支睾吸虫线粒体苹果酸脱氢酶基因的原核表达及重组蛋白的功能鉴定
来源期刊
中国人兽共患病杂志
学科
医学
关键词
华支睾吸虫
线粒体苹果酸脱氢酶
异源表达
酶动力学参数
抑制
年,卷(期)
2005,(10)
所属期刊栏目
论著
研究方向
页码范围
863-866
页数
4页
分类号
R383.2
字数
2841字
语种
中文
DOI
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研究主题发展历程
节点文献
华支睾吸虫
线粒体苹果酸脱氢酶
异源表达
酶动力学参数
抑制
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
中国人兽共患病学报
主办单位:
中国微生物学会
出版周期:
月刊
ISSN:
1002-2694
CN:
35-1284/R
开本:
大16开
出版地:
福建省福州市津泰路76号
邮发代号:
34-46
创刊时间:
1985
语种:
chi
出版文献量(篇)
6893
总下载数(次)
10
总被引数(次)
38474
相关基金
广东省自然科学基金
英文译名:
Guangdong Natural Science Foundation
官方网址:
http://gdsf.gdstc.gov.cn/
项目类型:
研究团队
学科类型:
期刊文献
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