人源性rhG-CSF单链抗体基因的克隆和表达

• 作者: 杜润潘 石君帆 钱凯先
• 来源期刊: 浙江大学学报（工学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 单链抗体 G-CSF抗原 克隆 表达
• 年，卷（期）: 2005,（5）
• 所属期刊栏目: 生物工程
• 页码范围: 756-760
• 页数: 5页
• 分类号: Q813
• 字数: 3846字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3785/j.issn.1008-973X.2005.05.032

摘要

从构建的噬菌体表面展示文库中,筛选出全新的人源抗重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)特异单链抗体(ScFv)的噬菌体克隆.ScFv被克隆到pCANTAB 5E载体上,以E.coli TG1为宿主,进行噬菌体表面呈现,以rhG-CSF为靶抗原进行免疫亲和富集筛选,经酶联免疫吸附试验(ELISA)鉴定,得到一株高亲和力克隆.DNA序列分析表明,该ScFv基因全长733 bp,其中重链可变区(VH)为366 bp,轻链可变区(VL)为322bp.抗rhG-CSF的ScFv在E. coli HB2151中以可溶形式分泌表达,产物主要分布于周质中,占周质总蛋白的质量分数为20%～25%,经免疫印迹试验(Western-blot)分析显示该单链抗体黏均分子量为31 kD.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	石君帆	浙江大学生命科学学院	4	5	1.0	2.0
3	钱凯先	浙江大学生命科学学院	44	680	13.0	25.0
6	杜润潘	浙江大学生命科学学院	1	0	0.0	0.0