食品中副溶血弧菌FQ-PCR快速检测方法的研究

• 作者: 焦红 王伟毅 王方金 程刚 翁文川 谢钧宪
• 来源期刊: 卫生研究
• 学科: 医学
• 关键词: 荧光定量PCR 副溶血弧菌 定量检测试剂盒
• 年，卷（期）: 2005,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 457-460
• 页数: 4页
• 分类号: R155.5|R378.3
• 字数: 3843字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-8020.2005.04.024

摘要

目的利用荧光定量PCR技术,研制适合各层次实验室使用的,快速、准确地检测鉴定食品中副溶血弧菌污染的定性、定量方法.方法根据副溶血弧菌gyrase基因序列,设计并合成特异性引物和荧光标记探针,将扩增后的特异片断制成阳性模板,绘制标准曲线.以副溶血弧菌菌株8株及同源、非同源参考菌株24株,做特异性检测;将阳性污染菌按梯度加入阴性样品为模拟样本,做敏感性检测.同时使用PE7000型定量PCR仪和国产DA620微量荧光检测仪检测.结果该方法有良好的特异性:8株副溶血弧菌结果均为阳性,而其它24株菌株均为阴性(其中8株是弧菌科,16株分别来自不同的菌属);该方法有良好的敏感性:阳性模板浓度与定量曲线循环阈值之间相关系数达到0.9871.在纯培养的条件下,其检测低限为10cfu/ml.对32个模拟样本直接进行定量检测,则检测低限在102cfu/g;经过24小时增菌培养,检测低限可达2cfu/g.结论该方法特异性强、敏感性高,操作简便快速,能避免常规PCR方法易污染的缺陷,在国产仪器上测试同样取得较好的敏感性和特异性,便于基层实验室使用,具有很好的推广应用前景.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	焦红	广州出入境检验检疫局食品检验中心	24	120	6.0	10.0
2	程刚	中山大学达安基因诊断中心	16	83	5.0	8.0
3	翁文川	广州出入境检验检疫局食品检验中心	12	114	6.0	10.0
4	王伟毅	中山大学达安基因诊断中心	9	87	5.0	9.0
5	王方金	中山大学达安基因诊断中心	15	105	5.0	10.0
6	谢钧宪	广州出入境检验检疫局食品检验中心	16	134	7.0	11.0