猪轮状病毒JL94株vp4全基因克隆及原核表达载体构建

• 作者: 于晓龙 宋岩 李一经 李宝贤
• 来源期刊: 微生物学杂志
• 学科: 农学
• 关键词: 猪轮状病毒 vp4基因 克隆 原核表达载体构建
• 年，卷（期）: 2005,（2）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 54-57
• 页数: 4页
• 分类号: S852.65
• 字数: 3223字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-7021.2005.02.013

摘要

根据GenBank已发表的猪轮状病毒vp4基因保守序列,设计一对引物扩增猪轮状病毒地方株JL94株vp4全基因;将扩增产物与载体pMD-18T连接进行序列测定并将测序结果同国外分离株进行序列比较.用限制性内切酶BamHI和SalI将vp4基因从pMD-18T-vp4切下;同样用BamHI和SalI双酶切表达载体pGEX-6P-1;将这2个双酶切产物连接并转化,通过酶切鉴定和PCR鉴定证明完成了vp4原核表达载体的构建.测序结果表明:vp4全基因长2 362 bp,JL94株同国外分离株BEN-307株、Gottfried株vp4全基因片段核苷酸同源性分别为93.44%和69.43%;氨基酸同源性分别为96.06%和71.88%.说明JL94株同BEN-307株属同一VP4血清型,而同Gottfried株属于不同血清型.重组原核表达载体pGEX-6P-1-vp4的构建为表达VP4蛋白,研制诊断性抗原和病毒重组活载体疫苗奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李一经	东北农业大学动医学院病原分子生物学实验室	219	1679	20.0	27.0
2	于晓龙	东北农业大学动医学院病原分子生物学实验室	27	39	4.0	5.0
4	宋岩	东北农业大学动医学院病原分子生物学实验室	15	92	6.0	9.0
7	李宝贤	东北农业大学动医学院病原分子生物学实验室	5	16	2.0	4.0