人4-1BBL胞外区基因的克隆与表达研究

• 作者: 刘芳 姜文国 朱祯平 杨纯正 熊冬生 王金宏 许元富 邵晓枫 郭红星
• 来源期刊: 生物工程学报
• 学科: 医学
• 关键词: 4-1BBL 协同刺激分子 原核表达
• 年，卷（期）: 2005,（5）
• 所属期刊栏目: 基因工程
• 页码范围: 703-707
• 页数: 5页
• 分类号: R392.11
• 字数: 4309字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-3061.2005.05.005

摘要

用RT-PCR方法从人单核THP-1细胞系克隆人4-1BBL胞外区基因,将其重组到pAYZ表达载体中,构建成人4-1BBL胞外区基因表达载体.将该载体转化大肠杆菌16C9,获得稳定表达,表达产物主要以可溶性状态存在;SDS-PAGE和Western blot分析显示,其分子量约为22kD,与预期结果一致.这是首次在大肠杆菌中获得4-1BBL胞外区可溶性表达.生物学活性检测显示4-1BBL对于维持T淋巴细胞系因子释放非常有益,同时PI单染表明它能抑制Jurkat细胞的凋亡.这将在抗肿瘤免疫治疗中具有潜在应用前景.