人LIGHT胞外区基因的克隆及融合蛋白的表达

• 作者: 冯惠东 姚智燕 尹晓琳 朱铁年 王秀荣 赵瑞景 马翠卿
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 人LIGHT基因 基因克隆 融合蛋白 原核表达
• 年，卷（期）: 2006,（1）
• 所属期刊栏目: 分子与细胞免疫学
• 页码范围: 37-40
• 页数: 4页
• 分类号: R392.11
• 字数: 3761字
• 语种: 中文

摘要

目的:克隆人LIGHT胞外区基因(hsLIGHT),构建其原核表达质粒,并诱导其在大肠杆菌中表达融合蛋白.方法:采用RT-PCR方法从HL60细胞中扩增hsLIGHT,将其克隆入原核表达质粒pGEX-4T-2,构建其重组表达质粒pGEX-4T-2/hsLIGHT,以不同浓度IPTG诱导表达,于不同时间经SDS-PAGE和Western blot分析、鉴定.结果:经RT-PCR扩增获得的hsLIGHT序列与Genebank报道的LIGHT基因胞外区序列完全一致;SDS-PAGE和Western blot分析证实重组质粒可表达出相对分子量为47 000的蛋白,与GST-hsLIGHT融合蛋白分子量一致.结论:成功完成了人LIGHT胞外区基因的克隆及其原核表达质粒的构建,在大肠杆菌E.coli BL21中经IPTG诱导表达了融合蛋白GST-hsLIGHT,为进一步探讨LIGHT的抗肿瘤生物学活性、探索肿瘤免疫治疗新方法奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	赵瑞景	河北医科大学免疫学教研室	30	168	7.0	11.0
2	朱铁年	河北医科大学免疫学教研室	47	313	12.0	15.0
3	马翠卿	河北医科大学免疫学教研室	20	85	5.0	9.0
4	尹晓琳	河北医科大学免疫学教研室	38	331	10.0	17.0
5	王秀荣	河北医科大学免疫学教研室	22	68	5.0	7.0
6	姚智燕	河北医科大学免疫学教研室	19	33	3.0	4.0
7	冯惠东	河北医科大学免疫学教研室	16	52	5.0	6.0