EB病毒潜伏膜蛋白1胞外区融合蛋白的表达及纯化

• 作者: 冯振卿 张大为 朱进 陈仁杰
• 来源期刊: 南京医科大学学报（自然科学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 鼻咽癌 EB病毒 LMP1 胞外区 重组基因
• 年，卷（期）: 2008,（4）
• 所属期刊栏目: 基础医学研究
• 页码范围: 420-423
• 页数: 4页
• 分类号: Q786
• 字数: 2869字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-4368.2008.04.004

摘要

目的:在大肠杆菌中表达EB病毒潜伏膜蛋白1(LMP1)胞外肽段与谷胱甘肽S-转移酶(GST)融合蛋白,并用该融合表达蛋白检测EB病毒相关鼻咽癌(NPC)患者血清中的特异性抗体.方法:用BamH I和EcoR I将含LMP1胞外区重组基因的质粒pMD18-LMPI双酶切后,克隆到pGEx4T-2中.重组质粒经酶切鉴定、核酸序列分析后转化大肠杆菌BL21(DE3),以异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达融合蛋白,表达的蛋白经谷胱甘肽S-转移酶柱亲和层析纯化,纯化的蛋白经Westemblot法检测鉴定.结果:重组表达质粒经酶切鉴定为阳性,核酸序列分析正确.SDS-PAGE和Western blot结果显示表达的重组蛋白分子质量约为32.2 ku,此抗原能够与鼻咽癌患者血清中抗体特异性结合.结论:成功获得了LMP1胞外区重组基因表达的蛋白,并证明原核表达的LMP1胞外肽段保持了原有的抗原性,能够与EBV相关鼻咽癌患者血清中的抗体特异性结合.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	冯振卿	南京医科大学卫生部抗体技术重点实验室	140	833	14.0	21.0
2	陈仁杰	南京医科大学第二附属医院耳鼻咽喉科	29	116	6.0	10.0
3	朱进		66	357	9.0	16.0
4	张大为	南京医科大学第二附属医院耳鼻咽喉科	11	32	4.0	5.0