EB病毒潜伏膜蛋白2A胞外区重组基因在大肠杆菌中的表达及其在血清学检测中的应用

• 作者: 周锋 姚堃 尹全章 徐建 许文嵘 陈云
• 来源期刊: 南京医科大学学报（自然科学版）
• 学科: 医学
• 关键词: EB病毒 LMP2A 重组基因 表达 血清学检测
• 年，卷（期）: 2007,（3）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 209-212
• 页数: 4页
• 分类号: R373.9|Q74
• 字数: 3285字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-4368.2007.03.001

摘要

目的:构建EB病毒潜伏膜蛋白2A(LMP2A)胞外区重组基因的表达载体在大肠杆菌中表达,并将表达的蛋白用于EB病毒相关鼻咽癌(NPC)患者的血清学检测.方法:用BamHⅠ和EcoRⅠ将含LMP2A胞外区重组基因的质粒pEC2A双酶切后,克隆到pET32a中.重组质粒经PCR、酶切鉴定、核酸序列分析后转化大肠杆菌(E.coli)BL21,以异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达融合蛋白,表达的蛋白经镍柱亲和层析纯化,并用Western blot法检测其抗原活性.用纯化的蛋白进行鼻咽癌患者血清学检测.结果:重组表达质粒经PCR及酶切鉴定为阳性,核酸序列分析正确.SDS-PAGE和Western blot结果显示表达的重组蛋白分子质量约为40 ku.以此为抗原能在鼻咽癌患者血清中检测到特异性的抗体.结论:成功获得了LMP2A胞外区重组基因表达的蛋白,纯化的蛋白可用于EBV相关鼻咽癌患者的血清学检测.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	姚堃	南京医科大学微生物与免疫学系	93	802	14.0	25.0
2	周锋	南京医科大学微生物与免疫学系	35	392	8.0	19.0
3	徐建	南京医科大学微生物与免疫学系	23	102	6.0	9.0
4	陈云	南京医科大学微生物与免疫学系	27	69	4.0	7.0
5	许文嵘	南京医科大学微生物与免疫学系	13	17	3.0	3.0
6	尹全章	南京医科大学微生物与免疫学系	7	14	3.0	3.0