SARS病毒M蛋白编码基因在大肠杆菌中的克隆与表达

• 作者: 卢春 姚堃 姜平 曾怡 贾雪梅 钱超 黄丽
• 来源期刊: 南京医科大学学报(自然科学版)
• 学科: 医学
• 关键词: SARS冠状病毒 M蛋白 原核表达
• 年，卷（期）: 2004,（3）
• 所属期刊栏目: 病原生物学与免疫学研究专题
• 页码范围: 280-283
• 页数: 4页
• 分类号: R373.1
• 字数: 2501字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-4368.2004.03.027

摘要

目的:克隆SARS冠状病毒膜蛋白M胞外区编码序列,并将其置于大肠杆菌作融合表达.方法:从GenBank获得SARS病毒BJ01株膜蛋白M编码基因序列,人工合成其氨基端129-base-pair(bp)双向单链DNA序列,在5′和3′端分别引入BamHⅠ、Xho Ⅰ酶切位点,退火后形成双链DNA,常规法将其克隆到原核表达载体pGEX-6p-1中,构建含M蛋白编码基因的重组原核表达质粒.重组质粒经酶切鉴定,核酸序列测定和分析后转化大肠杆菌(E.coli)BL21感受态细胞,以异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达融合蛋白.结果:核酸序列测定与分析的结果表明,克隆的129 bp基因序列与基因数据库中所登记的BJ01毒株序列呈现100%同源性.IPTG诱导后的菌体,经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE),显示有一个大小为30.1 ku的融合表达蛋白产生.结论:M蛋白氨基端胞外区129 bp编码基因在E.coli中获得正确表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	卢春	南京医科大学微生物学与免疫学系	92	236	7.0	9.0
2	贾雪梅	南京医科大学第一附属医院妇产科	29	124	6.0	10.0
3	姚堃	南京医科大学微生物学与免疫学系	93	802	14.0	25.0
4	曾怡	南京医科大学微生物学与免疫学系	27	93	5.0	6.0
5	黄丽	南京医科大学微生物学与免疫学系	16	79	5.0	7.0
6	钱超	南京医科大学微生物学与免疫学系	14	42	4.0	5.0