腺相关病毒介导RNA干扰抑制EB病毒潜伏膜蛋白1基因表达

• 作者: 刘雄 周立辉 张宝 彭英 李刚 李晓华 李湘平
• 来源期刊: 中国耳鼻咽喉头颈外科
• 学科: 医学
• 关键词: 疱疹病毒4型,人 RNA干扰 鼻咽肿瘤 基因,肿瘤抑带
• 年，卷（期）: 2006,（11）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 762-765
• 页数: 4页
• 分类号: R3
• 字数: 2436字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-7002.2006.11.008

摘要

目的 构建针对鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)EB病毒(Epstein-Barr virus,EBV)潜伏膜蛋白1(Iatent memb rane protein 1,LMP-1)的特异性发夹状RNA(small hairpin RNA,shRNA)干扰序列的重组腺相关病毒(recombinantadeno-associated virus,rAAV)载体(rAAV-shRNA-LMP-1),介导其体外表达并鉴定其生物活性.方法 设计针对EBV-LMP-1的特异性shRNA干扰序列,采用分子克隆的方法,将干扰序列及U6启动子插入pAAV-2质粒中,采用无需包装辅助病毒的双质粒共转染方法制备rAAV-shRNA-LMP-1,测定其滴度及感染效率,RTPCR鉴定目的基因的抑制效率.结果 以rAAV-EGFP 5×104v.g(virus genome,病毒基因组数)/细胞转染C666-1细胞,转染效率大于95%,PT-PCR鉴定rAAV-shRNA-LMP-1以5×104v.g/细胞转染C666-1后目的基因抑制效率大于90%.结论 通过rAAV介导RNA干扰能有效抑制LMP-1基因表达,为进一步研究肿瘤基因治疗,尤其是动物实验奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘雄	广州市南方医科大学南方医院耳鼻咽喉科	4	16	3.0	4.0
2	李湘平	广州市南方医科大学南方医院耳鼻咽喉科	3	11	3.0	3.0
3	李刚	广州市南方医科大学南方医院耳鼻咽喉科	2	6	2.0	2.0
4	彭英	广州中山大学第二附属医院神经内科	1	3	1.0	1.0
5	张宝	广州市南方医科大学分子生物教研室	1	3	1.0	1.0
6	李晓华	南昌解放军第九四医院耳鼻咽喉科	1	3	1.0	1.0
7	周立辉	广州市南方医科大学南方医院耳鼻咽喉科	1	3	1.0	1.0