牛IgG Fc受体Ⅱ胞外区在大肠杆菌中的表达及特性鉴定

• 作者: 乔宏星 乔松林 席俊 张华 张改平 李青梅 王丽 王选年 郭军庆
• 来源期刊: 河南农业科学
• 学科: 生物学
• 关键词: 牛IgG Fc受体Ⅱ 胞外区基因 原核表达
• 年，卷（期）: 2005,（7）
• 所属期刊栏目: 畜牧·兽医
• 页码范围: 86-89
• 页数: 4页
• 分类号: Q786
• 字数: 2964字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-3268.2005.07.029

摘要

从牛肺巨噬细胞cDNA文库中扩增编码牛IgG Fc受体Ⅱ(boFcγRⅡ)胞外区基因,PCR产物经EcoR Ⅰ和HindⅢ双酶切后,插入原核表达载体pET28a的T7启动子下游,构建重组表达质粒pETboRⅡ.以pETboRⅡ转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达.SDS-PAGE分析诱导表达菌体可见分子量约为27kDa的蛋白条带,该表达蛋白在细胞质中主要以不溶性包涵体形式存在.Western blotting和Dot blot检测表明,boFcγRⅡ重组蛋白在变性条件下可与牛IgG特异结合,提示牛FcγRⅡ胞外区可能存在IgG线性结合表位.