表达H3N2亚型猪流感病毒HA基因重组伪狂犬病病毒的构建

• 作者: 仇华吉 倪健强 周国辉 李海燕 田志军 童光志
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 伪狂犬病病毒 猪流感病毒 重组病毒 HA
• 年，卷（期）: 2005,（10）
• 所属期刊栏目: 兽医
• 页码范围: 1043-1048
• 页数: 6页
• 分类号: S858.285.3|Q784
• 字数: 4919字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0366-6964.2005.10.012

摘要

将SV40启动子控制下的LacZ基因表达盒和CMV启动子控制下的H3N2亚型猪流感病毒(SIV H3N2)的HA基因插入到伪狂犬病病毒(PRV)通用转移载体pBdTK-Uni中,获得转移载体pLTK-HA.将该载体与PRV Bartha-K61株基因组DNA通过脂质体法共转染Vero细胞,经过10代蓝斑筛选、纯化和PCR鉴定获得了一株插入SIV HA基因的重组伪狂犬病病毒,命名为rPRV-HA.Western blotting和间接免疫荧光试验证实HA基因在重组病毒感染的细胞中获得了表达.用不同的细胞(PK-15、IBRS-2、Vero和鸡胚成纤维细胞)对该重组病毒与亲本病毒的增殖滴度和致细胞病变进行比较,未见显著差异,对第30代重组病毒的HA基因进行序列分析,表明该重组病毒遗传性状稳定.