DEN2重组E蛋白单克隆抗体的制备及其生物学活性

• 作者: 方丹云 晏辉钧 曾祥凤 江丽芳 汤云霞 魏惠永
• 来源期刊: 中山大学学报（医学科学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 登革病毒 病毒包膜糖蛋白 单克隆抗体
• 年，卷（期）: 2005,（1）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 56-60
• 页数: 5页
• 分类号: R373.3
• 字数: 3597字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1672-3554.2005.01.013

摘要

[目的]研制登革病毒E蛋白特异性单克隆抗体,鉴定其各种生物学特性.[方法]用纯化的Pichia pastoris酵母表达的DEN2重组E蛋白作为抗原,免疫Balb/c小鼠,采用传统的细胞融合、有限稀释法克隆化杂交瘤细胞,制备稳定分泌McAbs的细胞株.采用硫酸铵沉淀法纯化腹水中的McAbs,用ELISA、IFA、Western Blot和空斑减数中和实验等鉴定McAbs的各种生物学活性.[结果]用ELISA、IFA检测证实5株杂交瘤细胞产生的McAbs与DEN2重组E蛋白和DEN全病毒均有较高的亲和力;Western Blot分析发现其中3株杂交瘤细胞(3G3,6G11,4E3)分泌的McAbs能与其相对分子质量Mr=(66～69)×103的DEN2重组E蛋白结合.空斑减数中和实验证实所获得的单克隆抗体具有中和登革病毒感染C6/36细胞的作用.[结论]成功地制备了5株抗登革病毒E蛋白特异性的McAbs,为进一步研究E蛋白的结构和功能及临床诊断试剂盒研发打下了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	方丹云	中山大学基础医学院微生物学教研室	35	121	6.0	8.0
2	江丽芳	中山大学基础医学院微生物学教研室	68	274	7.0	12.0
3	曾祥凤	中山大学基础医学院微生物学教研室	32	228	10.0	13.0
5	晏辉钧	中山大学基础医学院微生物学教研室	18	83	5.0	8.0
6	魏惠永	中山大学基础医学院微生物学教研室	4	6	2.0	2.0
9	汤云霞	中山大学基础医学院微生物学教研室	4	11	2.0	3.0