重组鸡γ-干扰素在昆虫细胞中的高效表达

• 作者: 刘岳龙 孔桂美 秦爱建 许金俊 金文杰
• 来源期刊: 微生物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 重组鸡γ-干扰素 杆状病毒 表达 抗病毒作用
• 年，卷（期）: 2005,（5）
• 所属期刊栏目: 遗传学和分子生物学
• 页码范围: 697-701
• 页数: 5页
• 分类号: Q78
• 字数: 4192字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0001-6209.2005.05.008

摘要

将鸡γ-干扰素(ChIFN-γ)基因克隆到载体pFASTBAC1中,构建转移载体pFASTBAC1-ChIFN-γ,然后转化DH10Bac感受态大肠杆菌,通过位点特异性转座,将ChIFN-γ基因整合到Bacmid穿梭载体中,构建表达质粒Bacmid-ChIFN-γ;通过脂质体将表达质粒转染Sf9昆虫细胞,用间接免疫荧光试验鉴定重组鸡γ-干扰素(rChIFN-γ)的表达;通过水泡性口炎病毒感染鸡胚成纤维细胞(CEF)的细胞病变抑制试验,检测rChIFN-γ的活性.研究结果表明,感染重组杆状病毒的Sf9细胞能高效表达rChIFN-γ,且当每个细胞的感染量为1个病毒时,细胞在感染96h后,rChIFN-γ基因表达产物的活性最高,达到106～107.2U/mL.以rChIFN-γ进行对新城疫病毒(NDV)F48E8株、禽流感H5N1病毒(AIV-H5)和马立克氏病病毒(MDV)GA株的抗病毒活性试验,发现rChIFN-γ对AIV-H5和MDV GA株病毒有明显的抑制其致细胞病变作用,但对NDV F48E8株病毒在体外不能抑制其致细胞病变作用,仅能在病毒滴度上表现抑制效果.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	秦爱建	扬州大学江苏省动物预防医学重点实验室	153	1966	21.0	38.0
2	刘岳龙	扬州大学江苏省动物预防医学重点实验室	57	1051	19.0	30.0
3	金文杰	扬州大学江苏省动物预防医学重点实验室	85	1181	18.0	31.0
4	许金俊	扬州大学江苏省动物预防医学重点实验室	72	401	12.0	16.0
5	孔桂美	扬州大学江苏省动物预防医学重点实验室	52	330	10.0	16.0