人幽门螺杆菌外膜蛋白18000 DNA疫苗的构建及表达

• 作者: 余剑平 姜政 王丕龙 王新渝 黄爱龙
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 幽门螺杆菌 外膜蛋白 斑点印迹 真核表达载体
• 年，卷（期）: 2005,（2）
• 所属期刊栏目: 免疫学技术与方法
• 页码范围: 134-138
• 页数: 5页
• 分类号: R392.7
• 字数: 5152字
• 语种: 中文

摘要

目的:构建含人幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)18 000外膜蛋白编码基因的真核重组载体,并在COS-7细胞中表达,为核酸疫苗的开发奠定基础.方法:从原核表达质粒pET32a(+)/528中,酶切H.pylori 18000外膜蛋白编码基因片段,将目的基因与同样进行酶切、纯化的载体pcDNA3.1进行连接,而后转化并筛选含有目的基因的重组载体pcDNA3.1/528,并在COS-7细胞中表达,以RT-PCR,Western法检测其表达产物.结果:经单、双酶切证实插入的基因片段为H.pylori 18000外膜蛋白编码基因;采用RT-PCR方法,能够从转染的COS-7细胞中扩增出一条与目的基因大小一致的DNA片段,Western法等检测显示,该重组质粒能够在COS-7细胞中表达目的蛋白,而且具有生物活性.结论:成功地构建了核酸疫苗pcDNA3.1/528,并在COS-7细胞中表达,为H.pylori核酸疫苗的研制奠定了良好的基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王丕龙		151	971	16.0	24.0
2	黄爱龙	重庆医科大学肝炎研究所	236	1190	16.0	23.0
3	姜政		117	472	10.0	15.0
4	余剑平		11	30	3.0	5.0
5	王新渝	重庆医科大学应用技术学院	3	12	2.0	3.0