幽门螺杆菌Mr26 000外膜蛋白真核载体的构建及表达蛋白的鉴定

• 作者: 姜政 汪志群 王丕龙 王新渝 黄爱龙
• 来源期刊: 中国人兽共患病杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 幽门螺杆菌 外膜蛋白 斑点印迹 真核表达载体
• 年，卷（期）: 2004,（7）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 596-600
• 页数: 5页
• 分类号: R387.2
• 字数: 4645字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2004.07.011

摘要

目的构建含人幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)26 000外膜蛋白编码基因的真核重组载体,并在COS-7细胞中表达,为核酸疫苗的开发奠定基础.方法从原核表达质粒pET32a(+)/594中,酶切H.pylori 26 000外膜蛋白编码基因片段,将目的基因与同样进行酶切、纯化的载体pcDNA3.1进行连接,而后转化并筛选含有目的基因的重组载体pcDNA3.1/594,并在COS-7细胞中表达,以RT-PCR,Dot blot法检测其表达产物.结果经酶切证实插入的基因片段为H.pylori 26 000外膜蛋白编码基因;采用RT-PCR方法,能够从转染COS-7细胞中扩增出一条与目的基因大小一致的DNA片段;同时Dot blot法等检测显示,该重组质粒能够在COS-7细胞中表达目的蛋白.结论成功地构建了真核重组载体pcDNA3.1/594,并在COS-7细胞中表达,为H.pylori核酸疫苗的研制奠定了良好的基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王丕龙		151	971	16.0	24.0
2	黄爱龙		236	1190	16.0	23.0
3	姜政		117	472	10.0	15.0
4	汪志群		4	12	1.0	3.0
5	王新渝		3	12	2.0	3.0