表达人幽门螺杆菌外膜蛋白的穿梭质粒的构建及在耻垢分枝杆菌中的表达

• 作者: 向廷秀 姜政 王丕龙 谯敏 陶小红 黄爱龙
• 来源期刊: 中国现代医学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 大肠杆菌-分枝杆菌穿梭质粒 幽门螺杆菌 OMP 耻垢分枝杆菌
• 年，卷（期）: 2006,（20）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 3047-3051
• 页数: 5页
• 分类号: Q784
• 字数: 4395字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-8982.2006.20.003

摘要

目的 建立表达人幽门螺杆菌外膜蛋白重组耻垢分枝杆菌疫苗株,为进一步应用重组耻垢分枝杆菌疫苗防治幽门螺杆菌感染打下基础.方法 利用聚合酶链反应(Polymerase chain teaction,PCR)扩增的幽门螺杆菌的外膜蛋白528编码基因全长片段,克隆入pET32a(+),鉴定无误后,再亚克隆入大肠杆菌-分枝杆菌穿梭质粒pLA71,构建pLA71-omp载体,将pLA71-omp电转化耻垢分枝杆菌,经卡那霉素筛选后,抽提质粒用PCR法鉴定,Westernblot检测omp的表达及活性.结果 从幽门螺杆菌基因组中扩增出约528 bp的基因片段.所构建重组体阳性克隆经酶切和PCR鉴定与预期结果一致,测序结果确证了插入片段的正确性,Western blot检测说明幽门螺杆菌的外膜蛋白528编码基因在分枝杆菌中获得了表达并具有良好的免疫原性.结论 成功构建了幽门螺杆菌外膜蛋白528编码基因大肠杆菌-分枝杆菌穿梭表达质粒.该质粒能在E.coli/MS间进行穿梭,并在耻垢分枝杆菌中表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王丕龙	重庆医科大学附属第一医院消化内科	151	971	16.0	24.0
2	黄爱龙	重庆医科大学感染性疾病分子生物学教育部重点实验室	236	1190	16.0	23.0
3	陶小红	重庆医科大学附属第一医院消化内科	82	426	11.0	16.0
4	姜政	重庆医科大学附属第一医院消化内科	117	472	10.0	15.0
5	向廷秀	重庆医科大学附属第一医院消化内科	53	224	7.0	12.0
6	谯敏	重庆医科大学附属第一医院消化内科	21	71	5.0	6.0