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摘要:
目的构建高凝状态(prothrombotic states,PTS)大鼠肝脏差异表达基因正向消减cDNA文库并进行初步筛选.方法从PTS模型大鼠和对照大鼠肝脏提取poly A+ mRNA,分别以poly A+ mRNA为模板,依次合成单链和双链cDNA,经酶切成400~600 bp大小的片段.以PTS大鼠cDNA作为Tester,对照大鼠cDNA为Driver,进行抑制性消减杂交.将消减杂交第二次PCR产物cDNA克隆至pMD18-T载体上,然后转化细菌,获得PTS大鼠肝脏差异表达基因正向消减cDNA文库.用巢式PCR扩增法制备"正向"和"反向"消减cDNA探针;采用差异筛选方法,用这两种探针对PTS大鼠肝脏差异表达基因正向消减cDNA文库进行筛选;将获得的阳性克隆cDNA进行序列分析;并与GenBank DNA 数据库中的DNA序列进行同源性分析.结果成功构建了PTS大鼠肝脏差异表达基因正向消减cDNA文库,初步筛选发现两条PTS差异表达cDNA片段.结论成功构建了PTS大鼠肝脏差异表达基因正向消减cDNA文库.
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文献信息
篇名 高凝状态大鼠肝脏差异表达基因正向消减cDNA文库的构建与初筛
来源期刊 四川大学学报(医学版) 学科 医学
关键词 高凝状态 大鼠模型 差异表达基因 cDNA文库
年,卷(期) 2005,(6) 所属期刊栏目 论著
研究方向 页码范围 761-764
页数 4页 分类号 R541.1
字数 2588字 语种 中文
DOI 10.3969/j.issn.1672-173X.2005.06.001
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 刘秉文 四川大学华西基础医学与法医学院生物化学与分子生物学教研室 47 275 10.0 13.0
2 白怀 四川大学华西基础医学与法医学院生物化学与分子生物学教研室 44 192 9.0 10.0
3 沈涛 四川大学华西基础医学与法医学院生物化学与分子生物学教研室 12 47 5.0 6.0
4 方定志 四川大学华西基础医学与法医学院生物化学与分子生物学教研室 45 372 10.0 17.0
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高凝状态
大鼠模型
差异表达基因
cDNA文库
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期刊影响力
四川大学学报(医学版)
双月刊
1672-173X
51-1644/R
大16开
成都市人民南路三段17号
62-72
1959
chi
出版文献量(篇)
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