山梨糖脱氢酶基因在大肠杆菌染色体上整合及表达

• 作者: 张惟材 汪建华 郭蔼光 高书颖
• 来源期刊: 微生物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 山梨糖脱氢酶 Red重组 整合
• 年，卷（期）: 2005,（1）
• 所属期刊栏目: 研究简报
• 页码范围: 139-141
• 页数: 3页
• 分类号: Q93
• 字数: 3171字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0001-6209.2005.01.032

摘要

以质粒pKF3为模板,扩增出两翼与ptsG基因上下游序列同源,中间为氯霉素抗性基因的DNA片段,连至pMD18-T载体,构建得到pMD18-PC.以质粒pQE60-SDH为模板,扩增山梨糖脱氢酶基因sdh,与pMD18-PC连接,得到pMD18-PC-SDH.将其用PvuⅡ酶切,回收含ptsG1-cat-sdh-ptsG2的目的片段,电转化至JM109/pKD46,在Red重组酶的作用下,外源DNA片段与染色体上对应区域发生同源重组,将基因ptsG敲除,替换为cat-sdh基因,获得整合sdh基因的JM109s.经检测JM109s具有山梨糖脱氢酶活性.以ptsG基因上下游序列为引物,JM109s基因组DNA为模板进行PCR,扩增产物测序结果表明sdh基因染色体整合成功.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郭蔼光	西北农林科技大学生命科学学院	110	1264	19.0	27.0
2	汪建华	军事医学科学院生物工程研究所	46	163	6.0	10.0
3	张惟材	军事医学科学院生物工程研究所	75	603	13.0	22.0
4	高书颖	军事医学科学院生物工程研究所	5	35	3.0	5.0