人β2微球蛋白基因启动子的克隆及其在P815细胞中的活性研究

• 作者: 张兴黔 梅文瀚 钱关祥
• 来源期刊: 细胞与分子免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: β2微球蛋白 启动子 IFN-γ
• 年，卷（期）: 2005,（6）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 672-675
• 页数: 4页
• 分类号: R392.11
• 字数: 3694字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1007-8738.2005.06.003

摘要

目的: 克隆人β2微球蛋白(β2m)基因启动子,并研究其在小鼠肥大细胞瘤细胞P815中对下游报告基因的启动活性.方法: 用PCR法从基因组内扩增β2m基因启动子.通过基因重组的方法, 构建含此启动子的EGFP基因真核表达载体, 然后分别瞬时和稳定转染P815细胞.通过 RT PCR、荧光显微镜摄像和流式细胞术分析, 观察IFN-γ作用前后EGFP的表达.结果: 从基因组内扩增出302 bp的人β2m基因的启动子, 成功地构建了含此启动子的真核报告载体.RTPCR的结果表明, IFN-γ对启动子的活性具有诱导作用, 且呈浓度依赖性.流式细胞术的结果显示,在5×10 5 U/L IFN-γ作用下,尽管表达EGFP的细胞数量没有差异, 但刺激组EGFP的表达强度是未刺激组的2倍.结论: 人β2m基因启动子在小鼠肥大细胞瘤细胞P815中具有高度的启动活性.通过该启动子中所含干扰素刺激反应元件(ISRE),可在IFN-γ诱导作用下调控下游目的基因的表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	钱关祥	上海第二医科大学生物化学教研室及分子生物学实验室人类基因治疗研究中心	39	186	7.0	11.0
2	张兴黔	上海第二医科大学生物化学教研室及分子生物学实验室人类基因治疗研究中心	3	7	2.0	2.0
3	梅文瀚	上海第二医科大学生物化学教研室及分子生物学实验室人类基因治疗研究中心	2	4	1.0	2.0