人胶质细胞源性神经营养因子(hGDNF)成熟肽基因的克隆及原核表达

• 作者: 杨吉成 王金志 盛伟华 缪竞诚 谢宇锋
• 来源期刊: 苏州大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: hGDNF 基因表达
• 年，卷（期）: 2005,（1）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 34-37
• 页数: 4页
• 分类号: R977.6|R394.8
• 字数: 3193字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-0399.2005.01.011

摘要

目的分离人胶质细胞源性神经营养因子(hGDNF)成熟肽基因,并在E.coil中获得表达.方法以人的白细胞基因组DNA为模板,合成特异引物,采用PCR技术分离得到hGDNF成熟肽基因,并构建表达载体pET-21a(+)-hGDNF,转化大肠杆菌BL21(DE3),分别用IPTG和乳糖诱导表达,SDS-PAGE电泳检测hGDNF蛋白表达.结果PCR扩增出了400 bp的DNA片段,构建的表达载体pET-21a(+)-hGDNF经酶切、PCR鉴定均出现400 bp左右的条带,测序结果正确,用IPTG或乳糖诱导转化菌均有15kd大小的目的条带,表达的目的蛋白占菌体总蛋白30%以上,以包涵体形式存在.结论克隆得到人GDNF成熟肽基因并在大肠杆菌中得到了高效表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	缪竞诚	苏州大学医学院基础医学系	95	511	13.0	17.0
2	杨吉成	苏州大学医学院基础医学系	164	943	16.0	20.0
3	盛伟华	苏州大学医学院基础医学系	129	700	15.0	18.0
4	谢宇锋	苏州大学医学院基础医学系	51	324	11.0	15.0
5	王金志	苏州大学医学院基础医学系	20	105	6.0	9.0