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人sCR1结合C3b结构域基因的克隆及在大肠杆菌中高效表达
人sCR1结合C3b结构域基因的克隆及在大肠杆菌中高效表达
作者:
汪正清
罗雪
基本信息来源于合作网站,原文需代理用户跳转至来源网站获取
可溶性补体Ⅰ型受体
反转录多聚酶链式反应
互补DNA克隆
蛋白质表达
摘要:
目的克隆表达人可溶性补体受体1型(sCR1)结合C3b结构域基因.方法从外周血单核细胞中提取总RNA,RT-PCR克隆编码sCR1-SCR15-18的cDNA,连接pMD-18T载体进行DNA序列分析,再亚克隆pET32原核表达载体,构建pET32-sCR1-SCR15-18重组表达载体,转化BL21菌,用IPTG诱导表达,表达产物通过免疫印迹实验鉴定.结果获得了预期的扩增目的片段,成功构建了pMD-18T重组克隆载体,核苷酸测序结果与GenBank登录的人sCR1-SCR15-18 cDNA序列一致.成功的构建了原核表达载体pET32-sCR1-SCR15-18,目的蛋白的表达量占菌体总蛋白的40%,并在菌体内形成包涵体.免疫印迹实验显示,在分子量约43×103处出现单一条带的阳性结果.结论从单核细胞中克隆出sCR1-SCR15-18片段基因,人sCR1-SCR15-18在大肠杆菌中得到高效表达.
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文献信息
篇名
人sCR1结合C3b结构域基因的克隆及在大肠杆菌中高效表达
来源期刊
第三军医大学学报
学科
医学
关键词
可溶性补体Ⅰ型受体
反转录多聚酶链式反应
互补DNA克隆
蛋白质表达
年,卷(期)
2005,(15)
所属期刊栏目
基础医学
研究方向
页码范围
1551-1554
页数
4页
分类号
R378.21|R394-33|R394.3
字数
2599字
语种
中文
DOI
10.3321/j.issn:1000-5404.2005.15.007
五维指标
传播情况
被引次数趋势
(/次)
(/年)
引文网络
引文网络
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可溶性补体Ⅰ型受体
反转录多聚酶链式反应
互补DNA克隆
蛋白质表达
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研究去脉
引文网络交叉学科
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第三军医大学学报
主办单位:
第三军医大学
出版周期:
半月刊
ISSN:
1000-5404
CN:
50-1126/R
开本:
大16开
出版地:
重庆市沙坪坝区高滩岩30号
邮发代号:
78-91
创刊时间:
1979
语种:
chi
出版文献量(篇)
15739
总下载数(次)
28
总被引数(次)
97850
相关基金
国家自然科学基金
英文译名:
the National Natural Science Foundation of China
官方网址:
http://www.nsfc.gov.cn/
项目类型:
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学科类型:
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